柱層析硅膠操作方法：

勻漿法：

1.稱重:200-300目硅膠，稱30-70倍于上樣量；如果很難區分，也可以用100倍的硅膠H。干硅膠的視密度約為0.4，所以可以稱之為40g硅膠，燒杯量為100毫升。

2.攪拌均勻漿料：用玻璃棒充分攪拌干硅膠體積的兩倍溶劑。如果洗滌劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮系統，則與石油醚混合；如果洗滌劑是氯仿/醇系統，則使用氯仿。如果不能攪拌均勻漿料，則表明溶劑含水量過高，特別是乙酸乙酯/丙酮。如果不與水配伍，則須提前用無水硫酸鈉長期干燥。氯仿用無水氯化鈣干燥，以去除1%的醇。如果樣品對酸敏感，則不能使用氯仿系統通過柱。

3.安裝柱子：用棉花塞住柱子底部，無需使用海砂。加入約1/3體積的石油醚（氯仿），安裝儲液球，打開柱下活塞，一次將勻漿倒入儲液球中。隨著沉降，一些硅膠會粘在儲液球上，并用石油醚（氯仿）沖入柱中。

4.壓實：沉降完成后，加入更多的石油醚，用雙聯球或氣泵加壓，直至流速恒定。柱床大約被壓縮到9/10體積。無論是常規壓力柱還是加壓柱，都應采取這一步驟，這可以大大提高分離度，避免柱床柱時萎縮引起的開裂。

5.樣品：干濕法可以。海沙是不必要的。取樣后，加入一些洗滌劑，然后將一團脫脂棉塞到硅膠表面附近。然后你可以添加大量的洗滌劑，而不會破壞硅膠表面。

6.過柱和收集：柱層分析實際上是擴散和分離之間的權衡。洗滌強度過低不好。建議使用梯度洗滌。收集例：10mg樣品量，1g硅膠H，0.5ml蒸餾；1-2g樣品量，50g硅膠（200-300目），20-50ml蒸餾。

7.檢測:多使用專用噴霧劑。如果只使用紫外線燈，會損失更多的產品。紫外線的靈敏度一般比噴霧劑底部高1-2個數量級。

8.發光譜：收集到的產品通常需要在發光譜新結晶。如果樣品太少或液體，可以通過一個小凝膠柱作為送譜前的凈化手段。所謂的硅膠峰可以去除氫譜約1.5ppm。

干式樣品一般用于固體或高粘度的液體樣品。樣品用低沸點易溶劑溶解，加入1-3倍厚硅膠，干燥或旋轉干燥。干燥的標準是將硅膠制成細粉，而不是粘在瓶壁上。在安裝好的柱子上留下溶劑，慢慢進入吸附樣品的硅膠，振動柱子或添加一些溶劑，清洗粘在柱壁上的硅膠。

安裝柱子時，無論是濕法還是干法，用節橡膠管敲打，使柱子安裝均勻。只有柱子安裝均勻，分離效果才能好。

一般柱下的死體積太大，太大，許多分離的物質被重新組合在一起，導致分離失敗。RF值超過柱，這取決于分離化合物的情況。如果產品相對干凈，雜質點相距較遠，則RF值可以較大或分離。如果雜質點較多，TLC距離較近，RF值應較小，為0.1~0.2。

壓力可以提高洗滌劑的流動速度，減少產品收集時間，但也可以減少柱子的塔板數量。

當其他條件相同時，常壓柱效率高，但時間也長，如天然化合物的點。

離開，一根柱子個月也有。

減壓柱可以減少硅膠的使用，感覺可以節省一半或更多，但由于大量的空氣通過。

硅膠會使溶劑揮發（有時在柱外有水蒸氣凝結），以及一些更容易分解的東西。

不，還須同時使用泵(噪音大，時間長)。以前有很多。

減壓柱，對它有很深的感情，但自從嘗試加壓以來，幾乎再也沒有動過減壓的念頭。

頭了。